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沿波讨源虽“幽”必显——幽门螺杆菌抗体分型的应用价值_安博官方客服-体育官网平台app登录
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沿波讨源虽“幽”必显——幽门螺杆菌抗体分型的应用价值

来源:安博官方客服    发布时间:2024-10-18 05:22:24

  幽门螺杆菌(HP)是一种寄生在胃内的顽强细菌,粘附胃粘膜以及细胞间隙,不断繁衍,四处活动,通过粪-口、口-口、胃-口等方式悄悄“蛰伏”在胃部内四处传播,破坏胃粘膜“天然”保护屏障。基于我国家庭结构较为复杂关系,我国自然人群的感染率已超过50%,且比例仍在攀升。

  有科学研究表明幽门螺杆菌的感染与慢性胃炎,消化性溃疡、胃癌及胃粘膜相关组织淋巴瘤等疾病均有密切的感染关系。收集2022年6月份以来,我院健康管理科进行幽门螺杆菌抗体分型检测的564例体检人群,将其报告结果作为分析对象,年龄18-85岁,根据阳性区带的分子量不同即可判断HP类型,具体划分为阴性、Ⅰ型、Ⅱ型等三种类型,进行统计。将564例检测结果分析,结果显示如下表:

  由表可见:326例健康体检男性中,阴性占比39.2%,Ⅰ型占50.9%,Ⅱ型占25.0%。238例健康体检女性中,阴性占比25.0%,Ⅰ型占49.15%,Ⅱ型占11.0%。发现我县健康体检人群中感染幽门螺杆菌的基数占比较高,其中阳性率可达60.4%,数值不容小觑。

  根据幽门螺杆菌毒力强弱来精准区分Ⅰ型和Ⅱ型感染,不仅能精准指导临床的根除治疗,还对合理使用抗生素,避免抗生素的滥用,实现精准治疗和预防胃癌提供价值依据。

  患者,女,44岁,1月前患者腹部不适,无明显饮食障碍,体重无减轻,不伴恶心、呕吐,黑便,腹平坦,腹软,腹部无压痛、叩击痛、反跳痛,肝脾未触及,肾区无压痛叩击痛,肠鸣音正常。胃部检查相关检查报告如下:

  报告单显示该患者CagA(细胞毒抗体)和UreB(尿素酶B)反应呈阳性,提示感染幽门螺杆菌Ⅰ型。那么感染了幽门螺杆菌该如何治疗呢?幽门螺杆菌致病性分型该如何定义呢?HP分型检测与传统呼气C14试验有啥不一样的区别呢?家里一人感染,全家人是否都需要做hp筛查?带着这样一些问题,我们将一起走近“幽门”,寻“幽”觅径。

  为了明确出没出现幽门螺杆菌的感染,实验室采用纯手工操作免疫印迹法检测幽门螺杆菌(HP)感染,其分型检测分别为CagA(细胞毒素)、VacA(空泡毒素)、UreA(尿素酶A)、UreB(尿素酶B)。

  原理是将HP抗原用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,按分子量大小不同分开,再将其转移至硝酸纤维膜上,如果被检血清有相应抗体,应用酶联吸附反应,就会在抗原的相应位置出现显带,然后根据阳性区带的分子量不同即可判断HP类型,具体划分为阴性、Ⅰ型、Ⅱ型等三种类型,现分析如下。

  当存在细胞毒素或空泡毒素为阳性时,判定为Ⅰ型幽门螺杆菌,属于强毒力型,这类菌株感染能使胃上皮细胞出现空泡、变形和损害,引起溃疡和诱发癌变,针对这类患者要进行根除定向治疗。若只有尿素酶为阳性,则判定为Ⅱ型幽门螺杆菌,属于弱毒力型,这一类HP菌株毒性较小,感染后一般仅引起慢性浅表性胃炎而无临床症状,这类患者可不必进行除菌治疗。只动态观察,不适随访即可。

  目前现状幽门螺杆菌抗体检测是判断分泌细胞毒素的比较安全有效方法之一。正常的情况下,Ⅰ型幽门螺杆菌感染者不管有无症状均有必要进行治疗,Ⅱ型幽门螺杆菌感染者无症状可以不予以治疗;该患者检查幽门螺杆菌Ⅰ型表达CagA蛋白,易引起溃疡和诱发胃癌风险,其呼吸14阳性,表明该患者感染幽门螺杆菌非常严重,需询问家族病史,建议患者一家人都需要做个幽门螺杆菌分型的筛查,做好共同生活的亲属的预防和保护措施。

  在实验室幽门螺杆分型检测操作流程中,科主任发现HP显色带深浅有明显差别,并影响结果的判读。这是什么问题导致的呢?

  带着疑问,科主任带着小组成员一起,从操作的过程步骤,添加试剂前后顺序,多次思考研磨尝试,决定通过采取两组不同顺序加样进行比对,第一组:先加入洗涤液,后加血清。第二组:先加血清,后加洗涤液。通过对比实验发现:第一组染色剂容易附着在膜条上,使模条背景深,不容易清洗。第二组模条上显示印迹视觉上比较干净、清晰,比较好判读结果,最终采用第二组的操作流程。

  但还是存在一定缺点,膜条显示带区域着色依然比较浅,于是我们又进行技术上的改良,为了更清晰观察印迹膜上显色位置容易判断显带何种抗体,考虑增加酶的试剂量,既能保证显色带深度还又能模条上不会有污迹。

  我们采取又两组方案,一组标准加样,另一组增加酶试剂量,对比两组膜条上出现显带颜色深浅度,发现增加5微升的酶试剂,能加深显色带显色问题,更好的便于观察与结果判读。

  右图采用改良后的技术方法发现膜条的分型印迹明显,更利于观察判读。终上实验室经过在工作操作中发现改良摸索了一套适合我们科室自己的幽门螺杆菌的技术方法,优化了操作流程,提高了结果判读的准确性。

  幽门螺杆菌的检测的新方法有很多种,常见呼气实验C13/C14,HP分型检测,两者方法存在哪些区别?C13主要检测指标是尿素酶,表示是否有幽门螺杆菌的感染,但无法辨认Ⅰ、II型毒力菌株,而HP分型检测对感染HP患者可精准区分几型,确认要不要进行根除治疗而且不是受近期的用药影响和胃内局部病变影响,同时避免了过度使用抗生素带来身体上的副作用,减轻了患者的医疗费用负担。该检测操作方法简便,稳定性高,误差小,适用于胃部不适的初筛人群。

  幽门螺旋杆菌(HP)是常见的消化系统慢性感染病原菌之一。许多研究表明HP是慢性胃炎、胃溃疡的重要病因,1994年国际癌症研究中心将HP列为Ⅰ类致癌因子,对人类健康构成严重威胁。因此,在健康人群中进行HP检测,HP感染状况.早期发现HP感染,早诊断,早治疗,有利于减少慢性胃炎、胃溃疡的发生,降低胃癌等重大疾病的发生风险,提高人们的生活质量。

  但如此高感染率人群是否均有必要给予根除,采用HP的治疗成为临床比较困惑的问题。因此,采用免疫印迹法将HP分为Ⅰ型(高毒力株)和Ⅱ型(低毒力株)感染。有助于临床医生更精准地判断需要,进一步治疗的人群,对于减少抗菌药物滥用.避免耐药菌株的产生具备极其重大意义。

  血清学幽门螺杆菌分型检测准确性不受溃疡出血及胃黏膜萎缩的影响,抗体阳性后可通过呼气试验进一步明确是否有现症感染,在此基础上加以根除。进行HP血清学毒力分型检测,对于HP毒力阳性的感染者,更应积极地推荐HP根除治疗,来提升患者的治疗依从性。

  如果共同生活的亲属有一人感染幽门螺杆菌,需要接受正规治疗,并建议共同生活的亲属进行筛查或治疗,避免重复感染,呼吁大家提高公众的认识度,注意个人卫生,减少人群中、家庭的感染,提倡采用公筷制、分餐制、食具消毒,避免接触感染。

  世上没有靠描摹而成的风格,没有因刻意求似而成的大作。检验工作亦如此,在传统与创新中稳步前进,在操作与细节多思勤钻,不断地吸取学习,勇于推陈出新,才会创造出更多可能。

  [1]董欣红,胡伏莲,高文,et al. 免疫印迹法检测幽门螺杆菌分型的多中心研究[J].中华医学杂志,2016, 96(4):5.

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